كارباپېنېمغا قارشىلىق كۆرسىتىش گېنى (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
مەھسۇلات نامى
HWTS-OT045 كارباپېنېم قارشىلىق گېنى (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) بايقاش قورالى (فلۇئورېسسېنسىيە PCR)
ئېپىدېمىئولوگىيە
كارباپېنېم ئانتىبىئوتىكلىرى ئەڭ كەڭ دائىرىلىك باكتېرىيەگە قارشى تۇرۇش دائىرىسى ۋە ئەڭ كۈچلۈك باكتېرىيەگە قارشى تۇرۇش پائالىيىتىگە ئىگە بولغان ئادەتتىكى بولمىغان β-لاكتام ئانتىبىئوتىكلىرى. β-لاكتامازاغا بولغان مۇقىملىقى ۋە تۆۋەن زەھەرلىكلىكى سەۋەبىدىن، ئۇ ئېغىر باكتېرىيە يۇقۇملىنىشلىرىنى داۋالاشتىكى ئەڭ مۇھىم باكتېرىيەگە قارشى تۇرۇش دورىلىرىنىڭ بىرىگە ئايلاندى. كارباپېنېملار پلازمىد ئارقىلىق كېڭەيتىلگەن دائىرىلىك β-لاكتامازا (ESBLs)، خروموسوملار ۋە پلازمىد ئارقىلىق سېفالوسپورىنازا (AmpC ئېنزىملىرى) غا نىسبەتەن ئىنتايىن مۇقىم.
قانال
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | ئىچكى كونترول | ئىچكى كونترول |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
تېخنىكىلىق پارامېتىرلار
| ساقلاش | ≤-18℃ |
| ساقلاش مۇددىتى | 12 ئاي |
| ئۈلگە تىپى | بەلغەم، ساپ كولونىيە، تۈز ئۈچەيدىن ئېلىنغان سۈرتكۈچ |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5.0% |
| LoD | 103CFU/mL |
| خاسلىق | a) بۇ قورال ئۆلچەملەشكەن شىركەتنىڭ سەلبىي پايدىلىنىش ماتېرىياللىرىنى بايقىدى، ۋە نەتىجىلەر ماس كېلىدىغان پايدىلىنىش ماتېرىياللىرىنىڭ تەلىپىگە ماس كەلدى. b) ئۆزئارا تەسىر كۆرسىتىش سىنىقىنىڭ نەتىجىسى شۇنى كۆرسىتىپ بېرىدۇكى، بۇ ئۈسكۈنە باشقا نەپەس يولى كېسەللىكلىرى پاتوگېنلىرى، مەسىلەن، Klebsiella pneumoniae، Acinetobacter baumannii، Pseudomonas aeruginosa، Streptococcus pneumoniae، Neisseria meningitidis، Staphylococcus aureus، Klebsiella oxytoca، Haemophilus influenzae، Acinetobacter junii، Acinetobacter haemolyticus، Legionella pneumophila، Escherichia coli، Pseudomonas fluorescens، Candida albicans، Chlamydia pneumoniae، نەپەس يولى ئادېنوۋىرۇس، Enterococcus قاتارلىق باشقا پاتوگېنلار بىلەن ئۆزئارا تەسىر كۆرسەتمەيدۇ، ياكى باشقا دورىغا چىداملىق گېنلارنى ئۆز ئىچىگە ئالغان CTX، mecA، SME، SHV، TEM قاتارلىقلار بىلەن ھېچقانداق ئۆزئارا تەسىر كۆرسەتمەيدۇ. c) توسقۇنلۇققا قارشى تۇرۇش: مۇسىن، مىنوسىكلىن، گېنتامىسىن، كىلىندامىسىن، ئىمىپېنېم، سېفوپېرازون، مېروپېنېم، سىپروفلوكساسىن گىدروخلورىد، لېۋوفلوكساسىن، كلاۋۇلان كىسلاتاسى، روكسىترومىتسىن توسقۇنلۇق سىنىقى ئۈچۈن تاللانغان بولۇپ، نەتىجىلەر يۇقىرىدا تىلغا ئېلىنغان توسقۇنلۇق قىلغۇچى ماددىلارنىڭ كارباپېنېمغا قارشى تۇرۇش گېنلىرى KPC، NDM، OXA48، OXA23، VIM ۋە IMP نى بايقاشقا توسقۇنلۇق قىلىدىغان رېئاكسىيەسى يوقلۇقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. |
| قوللىنىلىدىغان ئەسۋابلار | قوللىنىشچان بىئوسىستېمىلار 7500 ھەقىقىي ۋاقىتلىق PCR سىستېمىسى QuantStudio®5 ھەقىقىي ۋاقىتلىق PCR سىستېمىلىرى SLAN-96P ھەقىقىي ۋاقىتلىق PCR سىستېمىسى (Hongshi تېببىي تېخنىكا چەكلىك شىركىتى) LightCycler®480 ھەقىقىي ۋاقىتلىق PCR سىستېمىسى LineGene 9600 Plus ھەقىقىي ۋاقىتلىق PCR بايقاش سىستېمىسى (FQD-96A،خاڭجۇ(بىئوئېر تېخنىكىسى) MA-6000 ھەقىقىي ۋاقىتلىق مىقدارلىق ئىسسىقلىق دەۋرىيلىكى (سۇجۇ Molarray شىركىتى) BioRad CFX96 ھەقىقىي ۋاقىتلىق PCR سىستېمىسى BioRad CFX Opus 96 ھەقىقىي ۋاقىتلىق PCR سىستېمىسى |
ئىش ئېقىمى
1-تاللاش.
تەۋسىيە قىلىنىدىغان ئېكىستراكسىيە رېئاگېنتى: ماكرو ۋە مىكرو سىناق ئومۇمىي DNA/RNA زاپچاسلىرى (HWTS-301)9-50، HWTS-3019-32، HWTS-3019-48، HWTS-3019-96) (بۇنى ماكرو ۋە مىكرو سىناق ئاپتوماتىك نۇكلېئىك كىسلاتا سۈمۈرگۈچ (HWTS-3006C، HWTS-3006B) بىلەن ئىشلىتىشكە بولىدۇ) جياڭسۇ ماكرو ۋە مىكرو سىناق مېد-تېخنىكا چەكلىك شىركىتى تەرىپىدىن ياسالغان. تاللۇس چۆكمىسىگە 200μL نورمال تۇز سۈيى قوشۇڭ. كېيىنكى قەدەملەر سۈمۈرۈش كۆرسەتمىسىگە ئەمەل قىلىشى كېرەك، تەۋسىيە قىلىنغان ئېلىيۇتسىيە مىقدارى100μL.
2-تاللاش.
تەۋسىيە قىلىنىدىغان ئېكىستراكسىيە رېئاگېنتى: تىيەنگېن بىئوتېخنىكا شىركىتى (بېيجىڭ) ئىشلەپچىقارغان نۇكلېئىك كىسلاتا ئېكىستراكسىيەسى ياكى تازىلاش رېئاگېنتى (YDP302). ئېكىستراكسىيە ئىشلىتىش كۆرسەتمىسىنىڭ 2-باسقۇچىغا قاتتىق ئەمەل قىلىپ باشلىنىشى كېرەك (تاللۇس چۆكمىسىگە 200μL بۇفېر GA قوشۇڭ ۋە تاللۇس تولۇق لەيلەپ قالغۇچە چايقىۋېتىڭ). ئېلېتۇتسىيە قىلىش ئۈچۈن RNase/DNaseسىز سۇ ئىشلىتىڭ، تەۋسىيە قىلىنغان ئېلېتۇتسىيە مىقدارى 100μL.
3-تاللاش.
تەۋسىيە قىلىنىدىغان ئېكىستىراكت رېئاگېنتى: ماكرو ۋە مىكرو سىناق ئۈلگە قويۇپ بېرىش رېئاگېنتى. بەلغەم ئۈلگىسىنى يۇيۇش ئۈچۈن، يۇقىرىدا تىلغا ئېلىنغان بىر تەرەپ قىلىنغان تاللۇس چۆكمىسىگە 1 مىللىلىتىر نورمال تۇز ئېرىتمىسى قوشۇپ، 13000 ئايلانما/مىنۇت سۈرئەت بىلەن 5 مىنۇت مەركەزدىن قاچۇرۇش كېرەك، ئاندىن ئۈستۈنكى سۇيۇقلۇق چىقىرىۋېتىلىدۇ (10-20µL ئۈستۈنكى سۇيۇقلۇقنى ساقلاڭ). ساپ كولونىيە ۋە تۈز ئۈچەي سۈرتكۈچ ئۈچۈن، يۇقىرىدا تىلغا ئېلىنغان بىر تەرەپ قىلىنغان تاللۇس چۆكمىسىگە بىۋاسىتە 50µL ئۈلگە قويۇپ بېرىش رېئاگېنتى قوشۇڭ، كېيىنكى قەدەملەر ئىشلىتىش كۆرسەتمىسىگە ئاساسەن ئېكىستىراكتت قىلىنىدۇ.
